Tema: Detección molecular de una nueva influenza humana (H1N1) del potencial pandémico mediante ensayos de RT-PCR cuantitativa convencionales y en tiempo real
Objetivo: Desarrollar un RT- PCR adicional para discriminar de otros virus y subtipos H1 humanos
Muestra Biológica: Aspirado nasofaríngeo
Tipo de Ácido de Nucleico: ARN viral
Genes a amplificar: Gen que codifica para la HA
Extracción del ADN: QIAamp Virus RNA Mini Kit (Qiagen)
Tipo de PCR: PCR en tiempo real
Pasos:
Desnaturización: 95 ºC - 30s
Alinamiento: 57ºC - 30 s
Extensión: 72ºC - 20s
Numero de ciclos: 50
Visualización: EFO
Sensibilidad: 1.0 x 104 (a la cuarta) (dosis media infecciosa en cultivo)
Especificidad: 100%
Poon, L; Chan, G; Smith, C; Leung, Y. Molecular Detection of a Novel Human Influenza (H1N1) of Pandemic Potential by Conventional and Real-Time Quantitative RT-PCR Assays. Internet [2013]. Disponible : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19439731
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