EJEMPLO DE TERAPIA DE STEM CELLS EN LA INFLUENZA

Las células estromales mesenquimales humanas reducen la lesión pulmonar aguda asociada a la influenza A H5N1 in vitro e in vivo
Actualmente, hay una falta de tratamientos efectivos para la lesión pulmonar aguda como resultado de infecciones respiratorias del virus. En este trabajo, los autores demostraron que las MSC, células madre multipotentes derivadas de la médula ósea, eran eficaces para resolver la patología relacionada con la lesión pulmonar asociada con la infección por la gripe H5N1.

En un modelo de cocultivo in vitro, las células epiteliales alveolares (AEC) se cultivaron con MSC humanas o fibroblastos de pulmón humano de control y se analizaron en cuanto a su capacidad para realizar funciones críticas del epitelio pulmonar. El co-cultivo con MSC condujo a una mejor capacidad para que los AEC transporten fluido desde su lado apical a su lado basal y aumenta la función de barrera de la monocapa de AEC contra el paso de solutos. En ratones viejos infectados con el virus H5N1, el tratamiento con MSCs humanas mejoró las tasas de supervivencia y disminuyó la pérdida de peso corporal como resultado de la infección. En comparación con los animales tratados con fibroblastos, los ratones inyectados con MSC tenían mejores funciones de transporte de fluidos y menos acumulación de proteínas en el líquido de lavado broncoalveolar.

Bibliografía:

Michael C. W. Chan, Denise I. T. Kuok, Connie Y. H. Leung, Kenrie P. Y. Hui, Sophie A. Valkenburg, Eric H. Y. Lau.Human mesenchymal stromal cells reduce influenza A H5N1-associated acute lung injury in vitro and in vivo. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4822574/ 

Link del video: https://www.youtube.com/watch?v=iZ2sYv3N-wY

EJEMPLO DE ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA Y EJEMPLO DE AND RECOMBINANTE EN LA INFLUENZA

Ejemplo de ADN Recombinante en la Naturaleza

1. Episomas: en bacterias después de una conjugación, al ceder una cadena monocatenaria de material extracromosómico (plásmido) a una bacteria carente de este, que finalmente termina en la agregación al cromosoma circular del organismo procarionte.

1.  Intercambio de Cromátides hermanas: en la Mitosis cuando las cromátides hermanas (de un único cromosoma) intercambian fragmentos de su material genético. 

Ejemplo de ADN Recombinante en la Influenza

Un ejemplo de ADN recombinante en la Influenza es la producción de "VACUNAS RECOMBINANTES CONTRA LA INFLUENZA". Existe una tecnología de producción de vacunas contra la influenza que fue aprobada para usar en el mercado de los EE. UU.  y que implica el uso de la tecnología recombinante. Este método de producción no requiere virus de la vacuna cultivados en huevos ni usa huevos de gallina en el proceso de producción. En cambio, los fabricantes aíslan una proteína específica de un virus de la vacuna recomendado que crece naturalmente ("tipo salvaje") (la proteína HA, que induce una respuesta inmunitaria en las personas). Estas proteínas luego se combinan con porciones de otro virus que crecen en células de insectos. Este virus "recombinante" de la vacuna luego se mezcla con células de insectos y se deja que se replique. A continuación, la proteína HA de la influenza se cosecha de estas células y se purifica. La proteína purificada se embala mientras se espera que la FDA realice las pruebas y apruebe la distribución de lotes. Por el momento la vacuna recombinante contra la influenza es la única que se produce 100% sin huevos en el mercado estadounidense.

Bibliografía:

Andersen, S; Sekelsky, J. [Internet,2016] «Meiotic versus Mitotic Recombination: Two Different Routes for Double-Strand Break Repair». Disponible en: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/bies.201000087

CDC. Vacunas contra la influenza. Disponible en: https://espanol.cdc.gov/enes/flu/protect/vaccine/how-fluvaccine-made.htm

EVALUACIÓN COMPARATIVA DE LA EFICACIA DE IAVchip DNA MICROARRAY EN EL DIAGNÓSTICO DE LA GRIPE A

El documento describe la evaluación comparativa de microarrays de ADN IAVchip, PCR de transcripción inversa (RT-PCR) y RT-PCR en tiempo real frente al aislamiento de virus en embriones de pollo y muestra su eficacia diagnóstica en la detección y subtipificación del virus de la influenza A. Las pruebas se evaluaron con el uso de 185 especímenes de humanos, animales y aves. El microarray IAVchip DNA demuestra una mayor eficacia diagnóstica (99,45%) en el diagnóstico temprano de influenza A en comparación con la PCR en tiempo real (98,38%) y RT-PCR (96,22%), lo que demuestra su clara superioridad. La sensibilidad diagnóstica de IAVchip DNA microarray (100%) excede la misma de RT-PCR (95.95%) y RT-PCR en tiempo real (97.96%) en el intervalo de intervalos de confianza estimados.

 El microarreglo de ADN IAVchip y la RT-PCR en tiempo real mostraron la misma especificidad diagnóstica (98.85%), mientras que la especificidad diagnóstica de la RT-PCR fue del 96.40%. IAVchip DNA microarray tiene una ventaja sobre las otras pruebas para el diagnóstico de influenza A y la identificación del virus como un método más rápido que permite realizar la detección y subtipificación simultáneas de alrededor de decenas de especímenes en un experimento durante 8-10 horas. 

Bibliografía:

NCBI [Internet]Comparative Evaluation of Effectiveness of IAVchip DNA Microarray in Influenza A Diagnosis. [Actualizado 23 Nov 2014], disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4274914/

ARTÍCULO DE PCR -INFLUENZA

Tema:  Detección molecular de una nueva influenza humana (H1N1) del potencial pandémico mediante ensayos de RT-PCR cuantitativa convencionales y en tiempo real

Objetivo: Desarrollar un RT- PCR adicional para discriminar de otros virus y subtipos H1 humanos

Muestra Biológica: Aspirado nasofaríngeo

Tipo de Ácido de Nucleico: ARN viral

Genes a amplificar: Gen que codifica para la HA

Extracción del ADN: QIAamp Virus RNA Mini Kit (Qiagen)

Tipo de PCR: PCR en tiempo real

        

     Pasos: 

     Desnaturización: 95 ºC - 30s

     Alinamiento:  57ºC - 30 s

     Extensión: 72ºC - 20s

     Numero de ciclos: 50

Visualización: EFO

Sensibilidad:  1.0 x 104 (a la cuarta) (dosis media infecciosa en cultivo)

Especificidad: 100%

Bibligrafía:

Poon, L; Chan, G; Smith, C; Leung, Y. Molecular Detection of a Novel Human Influenza (H1N1) of Pandemic Potential by Conventional and Real-Time Quantitative RT-PCR Assays. Internet [2013]. Disponible : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19439731